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細菌塗抹検査(歯周ポケット)

【読み】
さいきんとまつけんさ(ししゅうぽけっと)
【英語】
smearing examination of bacteria(periodontal pocket)
【辞典・辞典種類】
歯科臨床検査事典
【詳細】
【定義】歯周ポケット内細菌を採取し、塗抹後、単染色、グラム染色あるいはギムザ染色などを行い鏡検することをいう。
【目的】歯周疾患病原細菌とされているグラム陰性細菌の証明あるいは急性壊死性潰瘍性歯肉炎(ANUG)に多く検出できるスピロヘータや紡錘菌を証明することを目的とし、これによって鑑別診断、治療方針、薬物の選択などに利用できる。
【適応疾患名】歯周疾患。
【検査法】歯周ポケット内には、さまざまな形をした細菌が存在するが、特徴的なのはグラム陰性の細菌が多いということである。したがって、グラム染色について記述すると、まず、歯肉縁上プラークを滅菌綿球で可及的に除去したのち、滅菌ぺ一パーポイントを歯周ポケットに挿入し、プラークを採取、その後は、
1)塗抹(smearing):スライドグラスに常水を1滴とり、採取試料を混ぜうすく塗り広げる。
2)乾燥(drying):空気中で自然乾燥するか、遠火でわずかに温めて乾燥する。
3)固定(fixing):塗抹面を上にして火焔中(還元烙内)をゆっくりと3回通過させる。
4)染色(staining):石炭酸ゲンチアナ紫液で1分間染色。
5)石炭酸ゲンチアナ紫液を捨て去り、水洗しないでそのままルゴール液を注ぎ、液を1回交換して1分間作用させる。
6)ルゴール液をすてる(水洗しない)。
7)脱色(decolorization):無水エーテルを注ぎ軽くゆすってはすて、色素がもはや溶け出さぬ程度まで作用させる。ただし、1分間を限度とする。
8)水洗(washing)
9)後染色(after staining):パイフェル氏液で2~3分間以上染色する。
10)水洗(washing)
11)乾燥(drying)
12)鏡検(microscopy)
という順序になる。また、歯周疾患のなかで、特殊歯周疾患として採り扱われている急性壊死性潰瘍性歯肉炎(ANUG)の場合の鑑別診断としては、次項に詳記するが、採取したポケット内細菌をギムザ染色し、鏡検する。その方法は、塗抹、乾燥、固定(メチールアルコール固定)、染色(ギムザ氏液)、水洗、乾燥、鏡検となる。
【結果】通常の歯周疾患の場合は、その原因菌とされているグラム陰性の桿菌が多数倹出できる。また、急性壊死性潰瘍性歯肉炎(ANUG)の場合は、スピロヘータ(Spirochetes)と紡錘菌(Fusiforms)が圧倒的に多く認められ、臨床症状とともに、鑑別診断あるいは薬物の選択などの有力な手段となる。